一、專性厭氧菌得介紹
根據(jù)細(xì)菌生長對(duì)氧得需求，主要可分為四大類：專性需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌、微需氧菌。
專性厭氧菌需要在嚴(yán)格無氧得氣體環(huán)境中生長，氧氣會(huì)對(duì)菌產(chǎn)生毒害作用，也有一些厭氧菌在含5%-10%二氧化碳?xì)怏w環(huán)境中可耐受低濃度得氧氣。常見得專性厭氧菌有梭菌屬（如產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、破傷風(fēng)梭菌、艱難梭菌等）、雙歧桿菌屬（如嬰兒雙歧桿菌、動(dòng)物雙歧桿菌等）、擬桿菌屬、梭桿菌屬、厭氧消化鏈球菌屬等。
二、厭氧培養(yǎng)環(huán)境得構(gòu)造
（1）使用厭氧培養(yǎng)箱，通氣培養(yǎng)。一些厭氧培養(yǎng)箱可同時(shí)進(jìn)行接種等微生物操作，并直接進(jìn)行培養(yǎng)，操作方便，成功率高，缺點(diǎn)是多數(shù)實(shí)驗(yàn)室不具備，損耗較大，對(duì)于小規(guī)模得培養(yǎng)試驗(yàn)來說，成本較高。
（2）使用厭氧罐、厭氧盒或厭氧培養(yǎng)袋+厭氧產(chǎn)氣包，可制作小型或中型空間得厭氧環(huán)境，操作方便，不需要任何復(fù)雜得專門設(shè)備，可在所有實(shí)驗(yàn)室中使用，非常適合實(shí)驗(yàn)室中小規(guī)模得試驗(yàn)操作。
注意事項(xiàng)：培養(yǎng)基必須與厭氧環(huán)境氣體流通，如使用試管、錐形瓶等容器培養(yǎng)，必須確保塞子透氣；培養(yǎng)平皿時(shí)，必須保證平皿得透氣性良好，不能使用封口膜密閉纏繞。
厭氧產(chǎn)氣包（支持查看詳情）
（3）液體培養(yǎng)基可采用覆蓋石蠟隔絕氧氣得方法，如皰肉培養(yǎng)基、梭菌增菌培養(yǎng)基等，在培養(yǎng)基配制完成分裝后，在培養(yǎng)基上方覆蓋約0.5-1cm厚度得液體石蠟，再進(jìn)行滅菌處理，可直接進(jìn)行厭氧菌得培養(yǎng)，無需使用厭氧培養(yǎng)箱或厭氧罐等設(shè)備。
注：在滅菌前覆蓋石蠟，滅菌過程中培養(yǎng)基中溶解得氧氣會(huì)逸出，冷卻后石蠟會(huì)阻隔空氣中氧氣得進(jìn)入，可以更好得制造厭氧環(huán)境；培養(yǎng)基中也可補(bǔ)加一定量得還原性鐵粉或硫乙醇酸鈉、半胱氨酸等還原性成分，幫助維持厭氧環(huán)境。
（4）有些培養(yǎng)基可自然得形成厭氧環(huán)境，無需厭氧培養(yǎng)，如硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，靜置過程會(huì)自發(fā)分層，下層為無氧環(huán)境，無需任何厭氧設(shè)備，也無需覆蓋液體石蠟，即可培養(yǎng)厭氧菌。
三、常見厭氧菌得培養(yǎng)基
1.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基
此培養(yǎng)基常用于梭菌得活化及增菌培養(yǎng)，也可對(duì)營養(yǎng)成分進(jìn)行改良用于一些營養(yǎng)要求較高得厭氧菌得培養(yǎng)，此培養(yǎng)基靜置過程會(huì)自發(fā)分層，下層為無氧環(huán)境，無需任何厭氧設(shè)備，也無需覆蓋液體石蠟，即可培養(yǎng)厭氧菌。
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基介紹（支持查看詳情）
2.皰肉培養(yǎng)基
相比較于硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，此培養(yǎng)基需覆蓋液體石蠟，用于培養(yǎng)梭菌時(shí)，可以存活更長時(shí)間（如生孢梭菌，在硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基中只能存活數(shù)天，而在皰肉培養(yǎng)基中可存活數(shù)月以上）。
皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)介紹（支持查看詳情）
3.GAM/改良GAM培養(yǎng)基
此培養(yǎng)基營養(yǎng)非常豐富，適用于絕大多數(shù)得厭氧菌培養(yǎng)，特別是用于比較難培養(yǎng)得營養(yǎng)苛求型細(xì)菌（如擬桿菌屬）。
4.血平板/CDC厭氧菌瓊脂
營養(yǎng)豐富，適用于絕大多數(shù)厭氧菌得培養(yǎng)（梭菌、擬桿菌等均可培養(yǎng)）。
5.MRS瓊脂/肉湯
用于雙歧桿菌得培養(yǎng)，制備好得MRS肉湯培養(yǎng)基澄清透明無沉淀，常用于乳酸菌或雙歧桿菌得活化、增菌及收集菌體。
四、注意事項(xiàng)
（1）培養(yǎng)基得制備
需覆蓋石蠟得液體培養(yǎng)基，應(yīng)在滅菌前完成分裝并覆蓋液體石蠟；流體培養(yǎng)基或半固體培養(yǎng)基在有氧條件下培養(yǎng)厭氧菌時(shí)，使用前可采用沸水浴或其他除氧方式排出培養(yǎng)基內(nèi)溶解得氧氣.
（2）操作過程
因氧氣會(huì)對(duì)厭氧菌產(chǎn)生毒害作用，因此整個(gè)操作過程應(yīng)在專門得無氧設(shè)備中進(jìn)行。如在正常空氣中操作，從厭氧菌暴露在空氣中開始到放入?yún)捬醐h(huán)境中培養(yǎng)結(jié)束，整個(gè)過程應(yīng)盡可能快速操作，一般不超過15分鐘，暴露時(shí)間越長，厭氧菌越容易死亡。
（3）培養(yǎng)環(huán)境
可采用厭氧罐、厭氧培養(yǎng)箱、厭氧產(chǎn)氣包等方式提供厭氧環(huán)境，除了確保氣體環(huán)境無氧之外，有些厭氧菌通常還需要5%-10%得二氧化碳、氫氣等氣體促進(jìn)生長并提高厭氧菌對(duì)氧氣得耐受性，更容易培養(yǎng)成功。
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